Jak restartovat sloupec C18

Krok 1

Odpojte sloupec C18 od průtokového proudu a vyměňte sloupec v opačném směru. Spuštění rozpouštědla zpět přes sloupec v opačném směru uvolní efekt balení, ke kterému dochází v průběhu času. Je třeba dbát na to, aby na konci sloupce neztrácel velké množství obalového materiálu. Někteří výrobci používají větší síť na horním konci sloupce, takže když je směr průtoku obrácen, větší ok je v pochozí poloze. Tato metoda regenerace se nazývá proplachování. K ochraně proti obalovému materiálu, který proudí do detektoru systému a případně způsobuje zástrčku, umožňuje systém pracovat bez připojeného detektoru a směřuje výstupní tok sloupku k odpadu.

Krok 2

Přívodní hadičku pro rozpouštědla vložte do řady rozpouštědel, aby se eluovaly sloučeniny uchované s kolonou v opačném směru. Série používaných rozpouštědel se liší v jejich hydrofilních charakteristikách. Změnou rozpouštědel budete eluovat sloučeniny stejně různorodé hydrofilní povahy. Použijte 50 ml každého z následujících rozpouštědel: vodu (pokud používáte pufr ve vašem rozpouštědle), methanol, isopropanol, dichlormethan, hexan, dichlormethan a isopropanol.

Krok 3

Znovu připojte sloupec ve správné orientaci a rozpouštědlem spusťte systém. Před použitím postupujte nejméně 75 ml rozpouštědla, aby se sloupec promyl. Proveďte vstřikovací test standardu, který jste provedli při novém sloupci a zkontrolujte výsledky. Věnujte zvláštní pozornost hodinám maximální retence, vrcholovým frontám a celkovému času analýzy. Míra, do jaké se tyto atributy shodují s počátečním provedením sloupce, když byla nová, bude znamenat, do jaké míry byl sloupec regenerován. Pokud výsledky nejsou uspokojivé, vyměňte sloupec za nový a vrhněte starý sloupec do koše.